滿洲里檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心動(dòng)檢實(shí)驗(yàn)室參加了由北京出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心所組織的樣品能力驗(yàn)證(H5亞型禽流感病毒核酸檢測(cè)),實(shí)驗(yàn)室使用熒光定量PCR法檢測(cè)樣品中H5亞型禽流感病毒核酸,6個(gè)樣品檢測(cè)結(jié)果完全滿意。
流感病毒屬于RNA病毒的正黏病毒科,分甲、乙、丙3個(gè)型。其中甲型流感病毒多發(fā)生于禽類,也可感染豬、馬、海豹和鯨類等哺乳類動(dòng)物和人類。乙型和丙型流感病毒則分別見于海豹和豬的感染。甲型流感病毒呈多形性,其中球形直徑80~120nm,有囊膜?;蚬?jié)為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。依據(jù)其外膜血凝素(H)/和神經(jīng)氨酸酶(N)蛋白抗原性的不同,可分為16個(gè)H亞型(H1~H16)和9個(gè)N亞型(N1~N9)。感染人的禽流感亞型主要為H5N1、H9N2、H7N7,其中H5N1高致病亞型,死率高。
熒光定量PCR技術(shù)是于20世紀(jì)90年代由美國(guó)Applied Biosystems公司推出的一種新型核酸定量技術(shù)。該技術(shù)實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,同常規(guī)PCR法相比,該方法特異性和可靠性更強(qiáng),能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng),且采用了完全閉管檢測(cè),不需PCR后處理,有效解決PCR污染問題以及EB對(duì)試驗(yàn)人員的傷害,再配以相應(yīng)的熒光PCR儀,使整個(gè)PCR過程實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,加之具有耗時(shí)短,操作方便等特點(diǎn)而備受推崇,因而廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全檢測(cè)、單核苷酸多態(tài)性(SNP)研究及病原體檢測(cè)等領(lǐng)域。
這次參加動(dòng)物檢疫能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),有著重要意義:一通過此次的能力驗(yàn)證工作建立起了完整的實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)技術(shù),為以后的動(dòng)物檢疫項(xiàng)目開展打下了穩(wěn)定的基礎(chǔ)。二為動(dòng)物檢疫實(shí)驗(yàn)室將來(lái)參加的國(guó)家相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證認(rèn)可做了穩(wěn)固的技術(shù)支撐。